Методика определения гликогена в лейкоцитах

Методика определения гликогена в лейкоцитах

Для цитохимического выявления гликогена применяются: йодная реакция, окраска кармином по Бесту и реакция на полисахариды с фуксин-сернистой кислотой по Бауэру. Согласно мнению большинства исследователей, последний метод является наиболее точным и демонстративным.

Гликоген был установлен Валентайном в 1951 г. в некоторых зрелых нейтрофилах. Вагнер считал, что внутриклеточное содержание гликогена свойственно только одной группе клеток крови — нейтрофилам. Однако это мнение не получило подтверждения, и в настоящее время наличие гликогена установлено также и в лимфоцитах, как при физиологических условиях, так и при патологии лимфопоэза. Однако наибольшее количество гликогена определяется в сегментоядерных нейтрофилах. В миелоидных элементах гликоген впервые появляется в виде глыбок на стадии миелоцитов, и по мере созревания нейтрофилов нарастает количество клеток, содержащих эти включения. При созревании нейтрофилов количество гликогена и них закономерно нарастало. Уменьшение гликогена в нейтрофилах наблюдалось нами при хронических и острых лейкозах, тяжелых гранулоцитопениях, не осложненных воспалительными заболеваниями или же кровотечениями.

При инфекциях и наличии воспалительных процессов в организме количество нейтрофилов, содержащих гликоген, нарастает. Флек, изучая содержание гликогена в лейкоцитах у кроликов, нашел, что в физиологических условиях только 2—3% лейкоцитов содержат глыбки гликогена, тогда как при инфекциях, воспалительных процессах, физической нагрузке, когда происходит активация основных функций лейкоцитов, процент нейтрофилов, содержащих гликоген, может возрастать до 20—50, а в некоторых случаях и до 80.

При инфекциях и наличии воспалительных процессов в организме количество нейтрофилов, содержащих гликоген, нарастает

Б. А. Павлову не удалось отметить изменений в содержании гликогена в нейтрофилах при значительном мышечном напряжении. По данным Робино, Базена и Деланайсодержание гликогена в отдельных клетках у одного и того же субъекта неравномерно, в некоторых нейтрофилах его очень много, в других — мало или даже совсем нет. Наши данные также свидетельствуют о неравномерном распределении гликогена в различных нейтрофилах. Однако все элементы содержат вполне определимые количества гликогена. Содержание гликогена в лейкоцитах закономерно нарастает при воспалении. Так, при обследовании 20 больных пневмонией Б. А. Павловым у всех из них было отмечено отчетливое увеличение процента интенсивно окрашенных нейтрофилов (в среднем, 17,5%, при норме 8%). Гликоген, по-видимому, принимает активное участие в обменных процессах и является основным энергетическим веществом, обусловливающим функциональную активность зрелых нейтрофилов. Большинство авторов считает степень насыщения клетки гликогеном верным показателем их функциональной полноценности и активности.

В зрелых нейтрофилах периферической крови было обнаружено также наличие липидов. Уитби и Бриттон считают, что из всех клеточных элементов периферической крови липоидная субстанция больше всего определяется в нейтрофилах, в моноцитах ее очень мало, а в лимфоцитах она совсем не содержится. Применяя различные методы окраски клеток периферической крови, Блум смог дифференцировать содержание фосфолипидов и нейтрального жира в гранулоцитах. По наблюдениям Э. И. Терентьевой, А. И. Зосимовской и Л. И. Казановой (1957) в миелоидных клетках костного мозга наличия жира установить не удалось, тогда как в некоторых нейтрофилах периферической крови здоровых людей реакция на жир была положительной. При остром и подостром ретикулезе доктора отмечают понижение содержания жира в гранулоцитах периферической крови, тогда как при хроническом миелозе жира в нейтрофилах крови оказалось больше.